หมุนขวดบรรจุเลือดในเครื่องหมุนเหวี่ยง 

จากนั้นเซลล์เม็ดเลือดแดงและเม็ดเลือดขาว รวมทั้งเกล็ดเลือดที่มีลักษณะเป็นก้อนกลมซึ่งทำหน้าที่จับตัวเป็นก้อนตามปกติ จะจมลงสู่ก้นบึ้ง ของเหลวใสยังคงอยู่เหนือพวกเขา ของเหลวนั้นเรียกว่า พลาสมา ประกอบด้วยน้ำที่มีเกลือ ฮอร์โมน เอนไซม์ แอนติบอดี และโปรตีนอื่นๆ ละลายอยู่ในนั้นในช่วงสองสามทศวรรษที่ผ่านมา แอนเดอร์สันและนักวิทยาศาสตร์คนอื่นๆ ได้ใช้กระบวนการที่เรียกว่าเจลอิเล็กโตรโฟรีซิสเป็นส่วนใหญ่เพื่อระบุโปรตีนในพลาสมา ในแนวทางนี้ ผู้วิจัยใส่พลาสมาที่ปลายด้านหนึ่งของแผ่นเจลและให้กระแสไฟฟ้าไหลผ่าน การเคลื่อนที่ด้วยกระแสผ่านเจลด้วยความเร็วตามน้ำหนักโมเลกุลและประจุไฟฟ้า โปรตีนในพลาสมาจะแยกออกจากกัน

จากนั้นนักวิจัยจะสกัดโปรตีนบริสุทธิ์ออกจากเจล

ในการทบทวนงานวิจัยพลาสมาโปรตีนที่ตีพิมพ์ในMolecular and Cellular Proteomics เดือนพฤศจิกายน 2545 แอนเดอร์สันและพ่อของเขา นอร์แมน จี. แอนเดอร์สัน ประมาณการว่ามีการระบุโปรตีนในพลาสมาประมาณ 290 ชนิดด้วยวิธีนี้ พวกเขาโต้แย้งว่าเจลอิเล็กโตรโฟรีซิสที่ใช้เองจะพบโปรตีนในเลือดเพิ่มขึ้นเพียงเล็กน้อย

ไม่ต้องสงสัยเลยว่ามีโปรตีนอีกมากมายแฝงตัวอยู่ในซีรั่ม นักวิจัยกล่าว เลือดสัมผัสกับเนื้อเยื่อเกือบทั้งหมดในร่างกาย และเซลล์ที่เสียหายหรือตายจะทิ้งสารในกระแสเลือดเป็นประจำ ตัวอย่างที่สำคัญคือโปรตีนครีเอทีนไคเนส MB ซึ่งเซลล์หัวใจที่กำลังจะตายบางส่วนจะปล่อยออกมา แพทย์ใช้โปรตีนที่มีอยู่ในพลาสมาเพื่อวินิจฉัยภาวะหัวใจวาย และความเข้มข้นของโปรตีนจะสะท้อนถึงปริมาณของเนื้อเยื่อหัวใจที่ได้รับความเสียหาย

พลาสมา “เป็นที่ที่ดีในการค้นหาโปรตีนที่รั่วออกจากเนื้อเยื่อ

” เอ็น ลีห์ แอนเดอร์สันกล่าว “ระบบไหลเวียนโลหิตเปรียบเสมือนคลองของเวนิส มันขนส่งสิ่งที่ดีทั้งหมดและยังขนส่งขยะจำนวนมากด้วย”

แต่มันไม่ง่ายเลยที่จะเห็นสิ่งดีๆ หรือขยะมากมายในพลาสมา เพราะมักถูกบดบังด้วยโปรตีนที่มีอยู่อย่างท่วมท้นเพียงไม่กี่ชนิด ที่อุดมสมบูรณ์ที่สุดคืออัลบูมินซึ่งขนส่งโปรตีนอื่น ๆ และรักษาความดันโลหิต

โดยตัวของมันเอง อัลบูมินคิดเป็นร้อยละ 60 ของปริมาณโปรตีนในซีรั่ม Pounds กล่าว โปรตีนที่มีมากที่สุด 10 ชนิด ซึ่งรวมถึงแอนติบอดี ตัวขนส่งธาตุเหล็กที่เรียกว่า ทรานสรินริน และไฟบริโนเจน มีสัดส่วนมากกว่าร้อยละ 90 ของโปรตีนในพลาสมาทั้งหมด โปรตีนอื่น ๆ อีกมากมายมีอยู่ที่ความเข้มข้นสัมพัทธ์ที่ต่ำมาก ตัวอย่างเช่น ความเข้มข้นของอัลบูมินอยู่ที่ 5 ถึง 10 พันล้านเท่าของอินเตอร์ลิวคิน-6 ที่ส่งสัญญาณของระบบภูมิคุ้มกัน

เลิกกันหมดแล้ว

นักวิจัยกำลังหาวิธีที่ดีที่สุดในการค้นหาโปรตีนในพลาสมาเพิ่มเติม บางคนเพิ่มเอ็นไซม์ในตัวอย่างพลาสมาเพื่อป้องกันการสลายโปรตีนตามธรรมชาติ แต่บางคนแย้งว่าเอ็นไซม์เหล่านี้อาจขัดขวางการค้นพบ ผู้ตรวจสอบจะถูกแบ่งออกเช่นกันว่าจะนำอัลบูมินออกก่อนที่จะวิเคราะห์ตัวอย่างหรือไม่ กลยุทธ์ดังกล่าวอาจช่วยระบุโปรตีนที่มีความอุดมสมบูรณ์ต่ำได้ แต่ก็เสี่ยงต่อการทิ้งโปรตีนในพลาสมาซึ่งเกาะติดกับโมเลกุลที่มีมากมายโดยไม่ตั้งใจ “อัลบูมินเป็นโปรตีนเหนียว” ปอนด์ตั้งข้อสังเกต

ดังนั้น ในการวิเคราะห์ล่าสุด เขาและเพื่อนร่วมงานไม่ได้กำจัดอัลบูมินออกจากตัวอย่างพลาสมา อย่างไรก็ตาม พวกเขาพยายามที่จะทำให้การวิเคราะห์ง่ายขึ้นโดยการลอกพลาสมาของปัจจัยการแข็งตัวของเลือด สิ่งนี้จะสร้างของเหลวที่เรียกกันทั่วไปว่าซีรั่มในเลือด

นอกจากนี้ ด้วยการใช้ของเหลวบนเม็ดบีดที่เคลือบด้วยโมเลกุลที่จับกับแอนติบอดี พวกมันจึงกำจัดโปรตีนภูมิคุ้มกันส่วนใหญ่เหล่านี้ออกไป จากนั้นจึงเพิ่มเอ็นไซม์ทริปซินเพื่อแยกโปรตีนที่เหลือออกเป็นชิ้นเล็ก ๆ หรือเปปไทด์ที่ยังจดจำได้

นักวิทยาศาสตร์ใช้ชุดเทคนิคโครมาโตกราฟีที่กระจายเปปไทด์ในสภาพแวดล้อมที่เป็นของเหลวหรือก๊าซมากกว่าบนแผ่นเจล กระบวนการนี้แยกเปปไทด์ที่ได้จากอัลบูมินออกจากเปปไทด์ที่สร้างจากโปรตีนชนิดอื่น Pounds กล่าว

ในที่สุด นักวิทยาศาสตร์ได้ฉีดเปปไทด์แต่ละกลุ่มเข้าไปในแมสสเปกโตรมิเตอร์ควบคู่กัน ซึ่งเป็นอุปกรณ์ที่ชั่งน้ำหนักเปปไทด์แต่ละชนิดแล้วแตกออกเป็นกรดอะมิโนที่เป็นส่วนประกอบและชั่งน้ำหนักแต่ละเปปไทด์ จากข้อมูลดังกล่าว นักวิจัยได้อนุมานลำดับกรดอะมิโนของเปปไทด์แต่ละชนิด จากนั้นระบุโปรตีนในเลือดที่มาจากเปปไทด์

เมื่อทีมของ Pounds ใช้ขั้นตอนที่ซับซ้อนนี้กับพลาสมาเพียงไม่กี่หยดจากสตรีที่มีสุขภาพดี ทีมดังกล่าวสามารถระบุโปรตีนได้ 490 ชนิด รวมทั้งโปรตีนบางชนิดที่มีความอุดมสมบูรณ์ต่ำ เช่น ฮอร์โมนการเจริญเติบโตของมนุษย์และแอนติเจนที่จำเพาะต่อต่อมลูกหมาก ในการวิเคราะห์ของพวกเขา ซึ่งรายงานในMolecular and Cellular Proteomics ฉบับเดือนธันวาคม พ.ศ. 2545 Pounds และเพื่อนร่วมงานของเขาอธิบายถึงการค้นพบโปรตีนในพลาสมาที่บันทึกไว้ก่อนหน้านี้เป็นส่วนใหญ่ แต่ไม่ใช่ทั้งหมด

โปรตีนชนิดหนึ่งที่ขาดหายไปคือโปรตีน C-reactive ซึ่งการมีอยู่สูงในเลือดอาจทำหน้าที่เป็นตัวทำนายโรคหัวใจ (SN: 12/7/02, p. 364: โปรตีนอาจส่งสัญญาณปัญหาเกี่ยวกับหัวใจ ) หัวใจของผู้บริจาคพลาสมาอาจแข็งแรงดีจนมีโปรตีน C-reactive ในเลือดเพียงเล็กน้อย หรือบางแง่มุมของแนวทางของ

Credit : เว็บยูฟ่าสล็อต